一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人支气管上皮细胞（Human Bronchial Epithelial Cells）
2. 细胞别称：HBEpiC；支气管上皮细胞；气道表皮细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体无呼吸道疾病史）
5. 组织来源：支气管黏膜组织
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态：扁平多边形，形成连续单层结构
8. 细胞代数：P3 - P8（确保功能性及遗传稳定性）
9. 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
10. 培养基：Bronchial Epithelial Cell Medium（含5% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~48 - 60小时（受培养密度及基质影响）
14. 供应限制：仅限科研使用，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 5天传代）
3. 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免剧烈吹打（防止纤毛结构损伤）
- 传代后12小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期存储
4. 复苏验证
- 复苏后48小时内检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：黏液分泌检测（P5代细胞需保持分泌活性）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5天内证实微生物污染（需提交污染检测报告）
- 复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色证据）
- 细胞STR分型与描述不符
2. 不予重发情形
- 客户未按规范进行细胞复苏（如超时解冻）
- 使用非指定培养基或添加剂导致功能异常
- 实验操作不当造成纤毛结构破坏
- 未定期检测支原体污染直接用于共培养实验
注：以上内容基于标准操作流程编制，实际应用需结合实验室具体条件调整优化。
