一、细胞基本属性
细胞名称:人支气管平滑肌细胞(Human Bronchial Smooth Muscle Cells)
细胞别称:HBASMC;支气管平滑肌细胞;气道平滑肌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无呼吸道疾病史)
组织来源:支气管组织平滑肌层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型长梭形,融合后呈束状平行排列
细胞代数:P3 - P8(确保收缩功能及标志蛋白表达稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS + 生长因子添加剂,如hEGF、胰岛素)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(受细胞密度及培养条件影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱2小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(避免过度融合导致分化)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶辅助解离),37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
注意事项:消化后需用含血清培养基中和,避免反复冻融影响收缩功能
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管,梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%),功能验证:α - SMA免疫荧光染色及钙离子刺激收缩实验
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货3天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 复苏后细胞存活率低于85%
4. 细胞标志物表达与说明书不符(需提供流式检测数据)
不予重发情形:
1. 未按推荐条件进行传代或冻存
2. 使用非指定培养基导致细胞功能异常
3. 实验操作不当造成机械损伤(如过度吹打)
4. 未在72小时内完成细胞复苏
(注:所有操作需符合生物安全规范,实验前需通过伦理审查)