一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肺腺癌成纤维细胞（Human Lung Adenocarcinoma - associated Fibroblasts）
- 细胞别称：肿瘤相关成纤维细胞；CAFs；肺腺癌间质成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：肺腺癌组织间质（经病理学确认的腺癌区域）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被的培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或星状，胞质延展，核仁明显
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用P4 - P6代以维持功能活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 双抗 + 生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃液氮长期保存
- 增殖能力：倍增时间约36 - 60小时（受肿瘤微环境模拟条件影响）
- 供应限制：仅限肿瘤微环境研究，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后静置培养箱4小时再换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（避免过度融合导致分化）
- 传代比例：1:2至1:4（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落
- 注意事项：
- 终止消化时需加入含血清培养基中和
- 定期检测α - SMA及FAP标志物以确认成纤维细胞特性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 冻存密度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL（高密度冻存提升复苏效率）
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，缓慢混合冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃ 过夜 → 转移至液氮
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：胶原收缩实验（P5代细胞应具备收缩活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 72小时内证实真菌/细菌污染（需提供微生物检测证据）
3. 细胞标志物表达与描述不符（需提供流式检测数据）
- 不予重发情形：
1. 未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引发细胞特性改变
3. 未使用推荐传代方法造成细胞分化或衰老
4. 超过说明书标注的细胞代次范围继续使用
