一、细胞基本属性
细胞名称
人主动脉瓣膜间质细胞(Human Aortic Valve Interstitial Cells)
细胞别称
HAVIC;主动脉瓣膜细胞;心脏瓣膜间质细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无心脑血管疾病史)
组织来源
主动脉瓣膜组织(经病理学确认无钙化或纤维化病变)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或多边形,融合后呈致密单层排列
细胞代数
P3 - P8(经端粒酶活性检测确认增殖稳定性)
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
ValveStem Medium(含5% FBS + 成纤维细胞生长因子及TGF - β抑制剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约72 - 96小时(与细胞传代代数及基质刚度相关)
供应限制
仅限基础研究使用,禁止用于临床治疗或药物筛选
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预温培养基
培养瓶:酒精消毒外表面后静置4小时再换液
传代标准
细胞密度达80% - 90%融合(建议每周传代1次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA(含1mM CaCl₂)
37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项
需使用胶原蛋白包被培养皿维持表型
换液时保留部分条件培养基以保持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
专用无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
消化离心后缓慢滴加冻存液混匀
程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证
复苏后48小时进行α - SMA免疫荧光鉴定
功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应保持基质合成活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度曲线)
2. 7天内证实细胞污染(需提供电镜扫描图像)
3. 活率低于85%(流式细胞术检测结果)
4. 基因表达谱与标准差异超过15%
不予重发情形
1. 未使用配套基质包被导致细胞脱落
2. 自行添加分化诱导剂改变细胞特性
3. 超过推荐传代次数引发表型漂移
4. 未按时提交细胞状态反馈报告