一、细胞基本属性
- 细胞名称:人颈动脉内皮细胞(Human Carotid Artery Endothelial Cells)
- 细胞别称:HCAEC;颈动脉内皮细胞;动脉内皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无心脑血管疾病史)
- 组织来源:颈动脉组织内膜层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型单层铺路石样排列,接触抑制后呈梭形或多边形
- 细胞代数:P3 - P8(经严格质量控制确保功能稳定与遗传背景一致)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS、VEGF及肝素添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%恒湿环境
- 冻存条件:无血清细胞冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期储存
- 倍增时间:约48 - 60小时(与传代密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不得用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预温培养基
- 培养瓶:表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液轻柔消化,37℃处理1.5 - 2分钟,及时加入含血清培养基终止反应
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打损伤细胞间紧密连接
- 传代后6小时内避免移动培养器皿以确保贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无蛋白冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:梯度降温程序:4℃预冷30分钟→ - 80℃冷冻过夜→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:Ⅷ因子免疫荧光染色及低密度脂蛋白摄取实验
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提交污染检测报告)
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
1. 解冻后未及时接种导致细胞聚集
2. 自行修改培养基配方影响细胞特性
3. 未按规程进行定期支原体检测
4. 实验操作不当引起的跨代次功能衰退