一、细胞基本属性
细胞名称
人主动脉平滑肌细胞(Human Aortic Smooth Muscle Cells)
细胞别称
HASMC;主动脉SMC;主动脉血管平滑肌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
组织来源
主动脉中膜层组织
生长特性
贴壁生长(依赖纤连蛋白或胶原包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或纺锤形,平行排列生长
细胞代数
P3 - P8(严格质控维持收缩功能与表型稳定性)
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时(受生长因子浓度及细胞密度影响)
供应限制
仅限科学研究,禁止临床治疗或基因编辑用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱1小时再换液
传代标准
细胞密度达80% - 90%融合(建议每周传代1 - 2次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 消化终止后需轻柔吹打防止肌丝断裂
• 传代后48小时内避免换液以保持自分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及能量代谢底物)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
• 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
• 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%)
• 功能验证:钙离子浓度检测及α - SMA免疫荧光染色
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 标志蛋白表达缺失(α - SMA、SM22α验证)
4. 细胞代次与声明不符
不予重发情形
1. 解冻后未按规程进行胶原包被处理
2. 自行添加高浓度血管紧张素导致表型转化
3. 超过推荐代次(P8)继续扩增
4. 未执行建议的血清饥饿同步化操作