一、细胞基本属性
- 细胞名称：人腔静脉外膜成纤维细胞（Human Superior Vena Cava Adventitial Fibroblasts）
- 细胞别称：HSVC - AF；腔静脉外膜成纤维细胞；血管外膜成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：腔静脉外膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，单层贴壁后呈典型成纤维细胞样排列
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖培养基批次与细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱2小时稳定状态
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞外基质过度破坏）
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应维持收缩蛋白表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 7天内证实真菌/细菌污染（需提供污染检测报告）
3. 复苏后存活率低于85%（台盼蓝染色法复检）
4. 细胞标志物检测与描述不符
- 不予重发情形：
1. 客户未按推荐条件进行原代培养扩增
2. 使用非配套培养试剂导致细胞形态异常
3. 自行修饰细胞后出现功能缺失
4. 未按要求进行定期支原体检测
（注：以上内容基于标准操作流程，实际应用需结合实验室具体条件优化。）
