一、细胞基本属性
细胞名称
人食管成纤维细胞（Human Esophageal Fibroblasts）
细胞别称
食管成纤维细胞；食道纤维细胞；HEFs
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无食管疾病史）
组织来源
食管组织黏膜下层或固有层
生长特性
贴壁生长（依赖细胞外基质黏附）
细胞形态
长梭形或不规则三角形，单层呈放射状排列
细胞代数
P3 - P8（经严格质控确保增殖活性与功能稳定性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
DMEM/F12（含10% FBS + 2mM L - 谷氨酰胺+1%非必需氨基酸）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时（受血清批次与接种密度影响）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物制药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶：酒精消毒外表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例
1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
终止消化时加入含血清培养基中和酶活性
首次换液需在传代后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
消化后离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期储存
复苏验证
复苏后48小时检测贴壁率（正常应＞85%）
功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞Ⅰ型胶原表达量≥2μg/10⁶ cells）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度监测曲线）
2. 7日内经qPCR证实支原体污染（需提供扩增曲线原始数据）
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供明场显微照片）
4. STR分型与数据库不符
不予重发情形
1. 未使用指定培养基导致细胞异常增殖
2. 实验操作污染引发交叉感染
3. 液氮储存设备故障导致反复冻融
4. 未按规范进行细胞传代（如机械刮取替代酶消化）
