一、细胞基本属性
- 细胞名称:人小肠成纤维细胞(Human Small Intestinal Fibroblasts)
- 细胞别称:HSIF;小肠成纤维细胞;肠道间质成纤维细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:小肠黏膜下层及固有层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或星形,贴壁伸展后呈典型成纤维样结构
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和遗传背景一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 成纤维生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(与细胞密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达90% - 95%(建议每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免过度传代(P8后功能可能衰退)
- 首次换液需在贴壁24小时后进行
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应维持分泌功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 3日内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 细胞复苏活力低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
4. STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:
1. 收货后超72小时未按规范复苏
2. 使用非指定培养基或血清导致功能异常
3. 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
4. 未进行无菌检测直接扩大培养
注:本产品符合国际细胞库质量标准,提供STR图谱及无菌检测报告。