一、细胞基本属性
细胞名称
人肝外胆管上皮细胞（Human Extrahepatic Biliary Duct Epithelial Cells）
细胞别称
EHBD细胞；胆管上皮细胞；胆管细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无肝胆系统疾病史）
组织来源
肝外胆管组织（经病理学确认无纤维化或炎症）
生长特性
贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态
单层立方状或多角形，细胞间形成紧密连接
细胞代数
P3 - P8（确保功能性标志物稳定表达）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
胆管上皮细胞专用培养基（含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~60 - 72小时（依赖细胞密度及培养基质）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA（含1mM EDTA）
• 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
• 消化后需轻柔吹打避免损伤微绒毛结构
• 首次换液建议在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀
• 梯度降温程序：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后24小时存活率≥90%（台盼蓝染色法）
• 功能验证：细胞角蛋白19免疫荧光染色（P5代细胞阳性率＞95%）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控报告）
2. 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供染色检测图像）
3. 细胞活率低于承诺值（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. 细胞特异性标志物鉴定未达标
不予重发情形
1. 未按说明书要求进行胶原包被培养
2. 使用非指定培养基导致细胞去分化
3. 超低温保存设备故障导致反复冻融
4. 未进行无菌检测直接用于共培养实验
