一、细胞基本属性
细胞名称
人肝星状细胞（Human Hepatic Stellate Cells）
细胞别称
HSC；肝脏星状细胞；肝窦周细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
组织来源
肝脏组织分离（经胶原酶灌注消化纯化）
生长特性
贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
细胞形态
静息态呈扁平星状，活化后转变为梭形或肌成纤维样
细胞代数
P3 - P6（优化传代区间以维持表型稳定性）
细胞规格
5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
Stellate Cell Medium（含10% FBS + 肝细胞生长因子及视黄醇补充剂）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时（静息态增殖缓慢，活化后加速）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床诊疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
·冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
·培养瓶：75%酒精擦拭外壁后静置培养箱4小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（静息态建议每5 - 7天传代）
传代比例
1:2至1:3（活化后细胞需提高接种密度至1×10⁴ cells/cm²）
消化方法
·使用0.25% Trypsin - EDTA（含1mM Ca²⁺维持膜稳定性）
·37℃消化3 - 5分钟，镜下观察胞体收缩后立即终止
注意事项
·避免频繁传代导致自发活化（建议P3后开始实验）
·传代后48小时内避免换液以减少应激反应
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及抗氧化剂）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
·预冷冻存液重悬细胞后分装至冻存管
·程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 4h → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
·复苏后48小时检测α - SMA表达（确认静息态纯度＞90%）
·功能验证：胶原分泌检测（P4代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
2. 7天内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞存活率＜85%（台盼蓝染色法定量）
4. 基因表达谱与产品描述不符（需提供qPCR原始数据）
不予重发情形
1. 未使用胶原包被培养皿导致细胞异常贴壁
2. 擅自添加TGF - β等因子诱导细胞活化
3. 超时未冻存（原代细胞离体超过72小时）
4. 未按规范进行脂滴染色即判定细胞状态
