一、细胞基本属性
- 细胞名称:人食管癌细胞(Human Esophageal Carcinoma Cells)
- 细胞别称:食管鳞癌细胞;食道癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年患者(具体年龄及性别信息可溯源至供体病历)
- 组织来源:食管癌组织原代分离(经病理学确诊为鳞状细胞癌或腺癌)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多角形或梭形,核质比高,成簇生长
- 细胞代数:P3 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(含优化冻存体系)
- 培养基:RPMI - 1640基础培养基(含10% FBS + 1%双抗 + 表皮生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃恒温;湿度:95%
- 冻存条件:程序降温冻存液(含8% DMSO及特异性保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖传代密度及生长因子补充)
- 供应限制:仅供肿瘤机制研究,禁止用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置4小时待细胞贴壁后换液
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代防止过度生长)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:0.25%胰酶 - EDTA溶液消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 终止消化时需加入含血清培养基中和
- 传代后6小时补充新鲜培养基以维持增殖活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存体系(含胎牛血清替代物及抗氧化成分)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:梯度降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
- 复苏验证:
- 存活率≥85%(流式细胞术检测)
- 功能验证:CCK - 8法检测P5代细胞增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 到货干冰完全挥发且细胞活性低于80%
2. 72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 细胞STR位点匹配率<80%
- 免责条款:
1. 客户自行更改培养基成分导致形态异常
2. 未使用程序降温盒直接冻存造成的结晶损伤
3. 超过推荐代数(P10)仍继续传代引发的变异