一、细胞基本属性
细胞名称:人腹膜间皮细胞(Human Peritoneal Mesothelial Cells)
细胞别称:HPMC;腹膜间皮细胞;腹腔间皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无腹腔疾病史)
组织来源:腹膜组织层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿)
细胞形态:扁平多角形或铺路石样单层排列,接触抑制后形成连续膜状结构
细胞代数:P3 - P8(经功能验证,确保分泌及屏障特性稳定)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Mesothelial Cell Medium(含5% FBS + 间皮细胞特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~72 - 96小时(受培养密度及包被基质影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1 - 2小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含1% BSA缓冲)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项
- 避免机械刮取(保护细胞间紧密连接结构)
- 建议使用预包被培养器皿以维持细胞极性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:透明质酸分泌检测(P5代细胞应保持基础分泌功能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)
2. 收货7日内证实微生物污染(需提交第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(经台盼蓝染色复检确认)
4. 细胞标志物检测与声明不符(如Calretinin表达阴性)
不予重发情形
1. 未按要求使用胶原/明胶包被培养器皿
2. 解冻后未在48小时内进行首次换液操作
3. 人为污染或误操作导致细胞状态异常
4. 未执行推荐传代流程导致细胞老化