一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肾足细胞(Human Renal Podocytes)
- 细胞别称:肾小球足细胞;足细胞;肾上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾组织肾小球区
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质涂层)
- 细胞形态:多突状或分支状,接触抑制后呈星形铺展
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与标志物表达一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用肾上皮细胞培养基(含5% FBS + 足细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖细胞密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱1小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.02% Trypsin - EDTA(含低浓度胶原酶)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取(保护细胞间连接结构)
- 传代后48小时内避免频繁换液,以维持足细胞分化状态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:免疫荧光检测足细胞标志物(WT - 1、Synaptopodin)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 5天内证实支原体/真菌污染(需提供qPCR检测结果)
3. 细胞复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色图像)
4. 标志物表达与产品描述不符(需提供免疫荧光证据)
- 不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时且未及时沟通
2. 使用未经验证的培养基或添加剂导致细胞异常
3. 未按规范进行基质涂层预处理
4. 实验操作不当导致足细胞去分化(如高浓度胰酶消化)
(以上内容基于科研级细胞产品通用规范编写,具体操作请以实际技术手册为准)