一、细胞基本属性
- 细胞名称:人输卵管成纤维细胞(Human Fallopian Tube Fibroblasts)
- 细胞别称:HTFF;输卵管基质成纤维细胞;输卵管纤维母细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成年女性(供体筛选无生殖系统疾病史)
- 组织来源:输卵管基质组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤状,单层贴壁后呈网状交织排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保细胞功能稳定及低代次活性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含血清替代型冻存液)
- 培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受细胞密度及培养条件影响)
- 供应限制:仅限于科学研究,禁止临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项:
- 避免消化过度影响细胞外基质分泌能力
- 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:血清替代型冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,缓慢混合冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞活性(台盼蓝拒染率≥90%)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应保持正常分泌功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7天内确认支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法复检)
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
1. 未按规范进行预冷培养基解冻操作
2. 使用非指定培养条件导致细胞分化异常
3. 反复冻融或长期超低温保存后二次冻存
4. 未在生物安全柜内操作引发交叉污染