一、细胞基本属性
细胞名称:人肾上腺皮质细胞(Human Adrenal Cortex Cells)
细胞别称:肾上腺皮质细胞;肾上腺类固醇生成细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体无内分泌疾病史)
组织来源:肾上腺皮质组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:多角形或梭形,单层贴壁排列,胞质富含脂滴
细胞代数:P3 - P8(确保激素分泌功能稳定)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:肾上腺皮质细胞专用培养基(含5% FBS及激素前体添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(依赖培养密度及激素刺激条件)
供应限制:仅供科学研究,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含1mM Ca²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项:
- 消化后需轻柔吹打避免损伤细胞膜完整性
- 传代后48小时内避免换液以维持激素分泌稳态
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO及能量代谢保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢加入预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 20℃过渡2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:皮质醇分泌检测(P5代细胞需维持基础分泌水平)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控报告)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测证明)
3. 复苏存活率低于承诺值(经双方复测确认)
4. 细胞特异性标记物鉴定不符
不予重发情形:
1. 未按规程进行胶原蛋白包被导致贴壁失败
2. 使用非指定培养基影响激素分泌功能
3. 反复冻融超过2次造成细胞损伤
4. 未进行无菌操作引发后续污染