一、细胞基本属性
- 细胞名称
- 人扁桃体动脉内皮细胞(Human Tonsillar Artery Endothelial Cells)
- 细胞别称
- HTAEC;扁桃体动脉内皮细胞;动脉内皮细胞
- 种属来源
- 人(Homo sapiens)
- 年龄性别
- 健康成人(性别不限,供体筛选无扁桃体疾病史)
- 组织来源
- 扁桃体动脉组织
- 生长特性
- 贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态
- 典型单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数
- P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格
- 1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基
- Endothelial Cell Medium(含2% FBS + 内皮细胞生长因子添加剂)
- 培养条件
- 气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件
- 无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间
- ~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制
- 仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱2小时平衡
- 传代标准
- 细胞融合度达85% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
- 传代比例
- 1:2至1:3(推荐接种密度5×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞收缩变圆后立即终止
- 注意事项
- 避免过度消化(损伤细胞间连接蛋白)
- 传代后24小时更换培养基以去除残留消化酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方
- 无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度
- 冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥95%)
- 功能验证:Transwell通透性检测(P5代细胞应维持基础屏障功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片)
- 2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供PCR检测报告)
- 3. 细胞活力低于90%(台盼蓝染色法)
- 4. STR鉴定与宣传不符
- 不予重发情形
- 1. 客户延迟复苏超过72小时
- 2. 使用非推荐培养基导致细胞状态异常
- 3. 反复冻融操作引起细胞损伤
- 4. 未按规范进行支原体检测即开展实验