一、细胞基本属性
细胞名称
人甲状腺微血管内皮细胞(Human Thyroid Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称
HTMEC;甲状腺微血管内皮细胞;甲状腺血管内皮细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无甲状腺疾病史)
组织来源
甲状腺组织微血管段
生长特性
贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
细胞形态
典型“鹅卵石样”单层,接触抑制后呈多角形
细胞代数
P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Endothelial Cell Medium(含2% FBS + 内皮细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀。
培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱2小时平衡。
传代标准
细胞融合度达85% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)。
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度5×10³ cells/cm²)。
消化方法
使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺),37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞收缩变圆后立即终止。
注意事项
避免过度消化(损伤细胞间连接蛋白);传代后24小时更换培养基以去除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
离心收集细胞后重悬于冻存液;梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮。
复苏验证
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥95%);功能验证:Transwell通透性检测(P5代细胞应维持基础屏障功能)。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片)。
2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供PCR检测报告)。
3. 细胞活力低于90%(台盼蓝染色法)。
4. STR鉴定与宣传不符。
不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时。
2. 使用非推荐培养基导致细胞状态异常。
3. 反复冻融操作引起细胞损伤。
4. 未按规范进行支原体检测即开展实验。