一、细胞基本属性
细胞名称
人扁桃体上皮细胞(Human Tonsillar Epithelial Cells)
细胞别称
HTEpiC;扁桃体上皮细胞;口咽上皮细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无扁桃体炎症或免疫相关疾病史)
组织来源
扁桃体组织上皮层(手术切除样本经酶消化法分离)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型铺路石样单层,接触抑制后呈扁平多角形
细胞代数
P3 - P8(保证功能稳定性与低传代变异风险)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Epithelial Cell Medium(含5% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(依赖培养密度与基质包被条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含低浓度Ca²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
- 避免机械刮擦(保护细胞间紧密连接结构)
- 传代后12小时内更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心后重悬细胞于冻存液,轻柔吹打均匀
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法,存活率≥90%)
- 功能验证:角蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应维持上皮特异性标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
2. 3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法验证)
4. 细胞标志物表达与描述不符(需提供流式检测数据)
不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 使用未经验证的培养基或试剂导致细胞功能异常
3. 自行修改消化参数引起细胞损伤
4. 未按规范进行细胞鉴定直接用于实验