一、细胞基本属性
- 细胞名称：人扁桃体静脉平滑肌细胞（Human Tonsillar Venous Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：HTVSMC；扁桃体静脉SMC；血管平滑肌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体无心血管或免疫系统疾病史）
- 组织来源：扁桃体静脉中膜层分离
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，平行排列生长
- 细胞代数：P3 - P6（确保收缩功能及标志物表达稳定性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：Smooth Muscle Cell Medium（含5% FBS + 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含7.5% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（依赖生长因子浓度及细胞密度）
- 供应限制：仅用于体外研究，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后，离心去冻存液，重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置4小时待细胞贴壁后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 85%（避免过度融合导致分化）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需中和液彻底终止反应
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含7.5% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后缓慢滴加冻存液，轻柔混匀
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 4h → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P4代细胞阳性率＞95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 7日内证实支原体污染（需提供荧光PCR结果）
3. 标志物表达不符合质检报告（需提供流式检测数据）
- 不予重发情形：
1. 未使用配套包被培养器皿导致贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引发细胞异常分化
3. 超过推荐代数（P6）仍要求功能一致性
4. 未执行推荐的血清饥饿处理即进行功能实验
