一、细胞基本属性
细胞名称
人宫颈平滑肌细胞(Human Cervical Smooth Muscle Cells)
细胞别称
HCSMC;宫颈平滑肌细胞;子宫平滑肌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别女性,供体筛选无宫颈病变史)
组织来源
宫颈组织平滑肌层
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
细胞形态
长梭形或纺锤形,成束生长,融合后呈典型的“峰谷”交错结构
细胞代数
P3 - P8(确保细胞功能活性与遗传稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS + 平滑肌细胞特异性生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时(依赖培养密度及包被基质类型)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心后重悬
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱内1小时平衡温湿度
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞收缩脱落后立即终止
注意事项
- 避免机械吹打过猛(易损伤收缩蛋白结构)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认平滑肌特异性标志物表达
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
2. 收到后3天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4. 细胞STR谱系与数据库不匹配
不予重发情形
1. 客户未按规范进行预包被处理导致贴壁失败
2. 使用非推荐培养基或添加剂引发细胞功能异常
3. 反复冻融或长期常温暴露导致细胞损伤
4. 未进行污染检测直接用于共培养实验
(注:以上内容基于标准操作流程,实际应用需结合实验室具体条件优化。)