一、细胞基本属性
- 细胞名称:人宫颈癌细胞(Human Cervical Cancer Cells)
- 细胞别称:HeLa细胞;宫颈癌上皮细胞;宫颈鳞癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年女性(供体为确诊宫颈癌患者)
- 组织来源:宫颈癌组织原代分离
- 生长特性:贴壁生长(依赖培养基营养成分)
- 细胞形态:典型多边形或梭形,贴壁紧密,增殖活跃
- 细胞代数:P5 - P10(保持高增殖活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含酚红指示剂),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止消化
- 注意事项:
- 避免消化不足导致细胞成片脱落
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀,梯度降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 1小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(需≥85%)
- 功能验证:CCK - 8法检测增殖活性(P5代细胞应保持高增殖能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控证明)
2. 到货72小时内证实真菌/细菌污染(需提供革兰氏染色报告)
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供显微照片)
4. STR分型结果与数据库不匹配
- 不予重发情形:
1. 未按说明书进行预温培养基直接接种
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 实验操作污染引发交叉感染
4. 未定期进行支原体检测导致实验中断