一、细胞基本属性
- 细胞名称：人乳腺癌相关成纤维细胞（Human Breast Cancer - Associated Fibroblasts）
- 细胞别称：CAFs；肿瘤相关成纤维细胞；乳腺癌基质细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：乳腺癌患者手术切除组织（供体信息经伦理审查，性别及年龄依样本来源）
- 组织来源：乳腺癌组织或肿瘤微环境分离
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：纺锤形或星状，具典型成纤维细胞伸展特征
- 细胞代数：P3 - P8（经功能验证，维持促肿瘤分泌特性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含5% FBS + 表皮生长因子 + 抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（受共培养条件或细胞活化状态影响）
- 供应限制：仅限肿瘤微环境研究，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置2小时后更换新鲜培养基
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（避免过度融合导致自发活化）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐预铺胶原提高贴壁效率）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱离
- 注意事项：
- 避免频繁传代（P8代后可能丧失肿瘤相关表型）
- 建议添加TGF - β抑制剂维持原代特性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活性（存活率≥85%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代应保持活化标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 物流温控异常导致细胞失活（需提供运输温度记录）
2. 到货72小时内证实支原体污染（需提供检测报告）
3. STR分型与数据库不匹配
4. 细胞增殖能力异常（经传代测试确认）
- 不予重发情形：
1. 未使用推荐培养基或添加未经验证的细胞因子
2. 细胞冻存后未经程序降温直接置入液氮
3. 实验操作污染导致细胞状态异常
4. 未按规范进行α - SMA表型验证即开展功能研究
注：本产品需配合伦理审查使用，禁止用于活体移植或商业转售。
