一、细胞基本属性
细胞名称:人子宫内膜成纤维细胞
细胞别称:HEDF;子宫内膜基质细胞;子宫成纤维细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无妇科疾病史)
组织来源:子宫内膜基质层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或星状多角形,胞质伸展明显
细胞代数:P3 - P8(维持分泌功能及增殖活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(受培养基批次及接种密度影响)
供应限制:仅限科学研究,禁止临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精消毒表面后静置于培养箱30分钟
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天观察一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞间隙增大后终止
注意事项:
- 消化过程中轻拍瓶壁辅助细胞脱落
- 首次换液需在接种后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 5%海藻糖)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后去上清,缓慢滴加冻存液重悬
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:胶原分泌量检测(P5代细胞应保持基质合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中液氮泄露导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7日内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞活性低于85%(通过Calcein - AM荧光染色判定)
4. 免疫荧光染色鉴定波形蛋白(Vimentin)阴性
不予重发情形:
1. 未使用建议的胶原包被培养器皿
2. 自行修改培养基配方导致细胞分化异常
3. 接种密度低于1×10³ cells/cm²引发衰老
4. 未按要求进行细胞功能验证直接用于实验