一、细胞基本属性
细胞名称
人阴道成纤维细胞(Human Vaginal Fibroblasts)
细胞别称
HVF;阴道基质细胞;阴道结缔组织细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成年女性(供体筛选无妇科疾病及感染史)
组织来源
阴道壁结缔组织层
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
长梭形或纺锤状,平行排列成束状或漩涡状
细胞代数
P3 - P8(维持表型稳定性及增殖能力)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Fibroblast Growth Medium(含10% FBS+成纤维细胞特异性添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(受血清浓度及细胞密度影响)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
·冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
·培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
·使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
·37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
·避免机械刮取损伤细胞膜完整性
·传代后12 - 18小时更换培养基以清除残余消化酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO + 30% FBS)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
·胰酶消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
·程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮长期保存
复苏验证
·复苏后24小时进行活率检测(台盼蓝拒染率≥90%)
·功能验证:胶原分泌量检测(P5代细胞应保持基质合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1.运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
2.到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3.STR分型与申报信息不符
4.复苏活率低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
不予重发情形
1.未使用配套包被培养瓶导致贴壁失败
2.自行修改培养基配方引发细胞异常
3.解冻后超72小时未进行换液操作
4.实验操作污染后未及时反馈仍继续培养
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,建议使用原代细胞专用培养耗材)