一、细胞基本属性
1. 细胞名称:人子宫微血管内皮细胞(Human Uterine Microvascular Endothelial Cells)
2. 细胞别称:HUtMEC;子宫微血管内皮细胞;子宫内膜内皮细胞
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 年龄性别:健康成年女性(供体筛选无妇科疾病史)
5. 组织来源:子宫组织微血管段(经伦理审查合规采集)
6. 生长特性:贴壁生长(需包被胶原蛋白或纤连蛋白基质)
7. 细胞形态:单层铺展呈多角形,接触抑制后呈典型“铺路石”样排列
8. 细胞代数:P3 - P8代(功能活性稳定,保留天然屏障特性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:内皮细胞专用培养基(含2%胎牛血清 + 内皮生长因子及肝素)
11. 培养条件:气相:5% CO₂,温度:37℃,湿度:95%恒湿环境
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)
13. 倍增时间:约48 - 72小时(与培养密度及基质包被相关)
14. 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:表面消毒后静置于培养箱1小时,再更换新鲜培养基
2. 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代,避免过度生长)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
4. 消化方法:使用0.02% EDTA - 胰酶混合液,37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
5. 注意事项:避免消化时间过长导致细胞膜损伤;传代后12小时内避免移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、20%血清替代物及海藻糖)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤:离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液;程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
4. 复苏验证:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法);CD31免疫荧光验证内皮特性;Ⅷ因子活性检测
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)
- 到货72小时内经检测证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- STR鉴定结果与备案数据不符(容差≤3个位点)
2. 不予重发情形
- 未按说明书要求进行预包被处理导致贴壁失败
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
- 未执行标准复苏流程导致的细胞活性下降
- 未在指定代次内完成实验而引发的功能异常