一、细胞基本属性
- 细胞名称：人角质形成细胞（Human Keratinocytes）
- 细胞别称：表皮角质细胞；皮肤角质形成细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无皮肤疾病史）
- 组织来源：皮肤表皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型铺路石样单层，接触抑制后呈多角形或鳞状
- 细胞代数：P3 - P8（确保细胞增殖活性与分化功能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：角质形成细胞专用培养基（含低浓度胎牛血清 + 表皮生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖培养基成分及细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，加入预热培养基离心洗涤
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 避免反复吹打（防止机械损伤）
- 传代后12小时内更换培养基以清除残余酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及糖类保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：角蛋白免疫荧光染色（P5代细胞应保持典型标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 5天内确认微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞复苏存活率低于85%（经我方实验室复测确认）
4. 细胞STR谱系与备案信息不符
- 不予重发情形：
1. 未按说明书要求使用专用培养基或包被条件
2. 客户自行延长传代代数（超过P10）导致功能异常
3. 解冻后未及时接种（超过24小时）
4. 实验操作污染（如未定期进行支原体检测）
注：以上内容基于标准操作流程，具体实验条件需根据研究需求优化。
