一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人外根鞘细胞（Human Outer Root Sheath Cells）
2. 细胞别称：HORSC；毛囊外根鞘细胞；ORS细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无皮肤疾病史）
5. 组织来源：毛囊外根鞘组织
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态：扁平梭形或多边形，单层贴壁后呈铺路石样排列
8. 细胞代数：P3 - P6（确保角质形成细胞标志物表达稳定性）
9. 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
10. 培养基：角质形成细胞无血清培养基（含EGF、胰岛素及钙离子添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无动物源冻存液（含10% DMSO及海藻糖），-150℃液氮长期保存
13. 倍增时间：约48 - 60小时（依赖培养基批次及接种密度）
14. 供应限制：仅限于体外研究使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加入5mL预温培养基离心洗涤。
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于培养箱，4小时后首次换液。
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（接触抑制明显时需及时传代）。
3. 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
4. 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - 0.02% EDTA混合液，37℃消化3 - 5分钟，加入含血清培养基终止反应。
5. 注意事项：避免频繁观察扰动细胞贴壁；传代后12小时建议添加2mM钙离子增强细胞连接。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清专用冻存液（含10% DMSO、20%胎牛血清替代物）。
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
3. 冻存步骤：消化离心后缓慢滴加冻存液，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存。
4. 复苏验证：复苏后48小时进行CK15免疫荧光鉴定；细胞活性≥85%（AO/PI双染法）；屏障功能通过跨膜电阻检测（TEER值≥80Ω·cm²）。
四、售后服务承诺
1. 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞活性＜80%（需提供物流温度曲线）。
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染。
- 细胞角蛋白19表达缺失（需提供流式检测数据）。
- STR分型与数据库不匹配。
2. 不予重发情形：
- 使用非指定培养基或自行修改添加剂配方。
- 解冻后超72小时未进行贴壁培养。
- 未按规范进行胶原预包被导致细胞脱落。
- 实验操作污染未提供微生物检测原始数据。
注：以上内容基于典型人外根鞘细胞特性编写，具体参数可能因批次差异微调，详询技术文档。
