一、细胞基本属性
- 细胞名称:人骨髓间充质干细胞(Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells)
- 细胞别称:BM - MSC;骨髓基质干细胞;间充质祖细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体经传染病及遗传病筛查)
- 组织来源:髂骨穿刺获取骨髓单核细胞层
- 生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形成纤维样,单层生长呈漩涡状排列
- 细胞代数:P3 - P8(维持多向分化潜能及表面标记表达)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T75培养瓶或1.5mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:MSC专用培养基(含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:程序降温冻存液(含5% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
- 倍增时间:48 - 72小时(与供体年龄及培养密度相关)
- 供应限制:研究级产品,不可用于临床治疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管复苏:37℃水浴轻摇解冻,加入8mL预温培养基梯度稀释
- 培养瓶处理:酒精擦拭外壁后静置4小时再换液
传代标准
融合度达80% - 85%(建议传代间隔4 - 5天)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含1mM EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲时终止
注意事项
- 严格维持低密度培养(高密度诱导自发分化)
- 传代后12小时补充新鲜生长因子
- 定期检测CD73/CD90/CD105阳性率(需≥95%)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清程序冻存液(含5% DMSO + 1%人血清白蛋白)
细胞密度
冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→每分钟降1℃至 - 80℃→液氮储存
复苏验证
- 台盼蓝存活率≥90%(解冻后立即检测)
- 分化能力验证:成骨/成脂诱导21天后染色鉴定(P5代应保持多向分化潜能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2. 收到后48小时内证实微生物污染(附第三方检测报告)
3. 表面标记阳性率未达承诺标准(流式细胞术复检)
4. 细胞倍增时间超过72小时(提供培养记录视频)
不予以重发情形
1. 使用非指定诱导分化培养基导致特性改变
2. 传代次数超过P8代后功能衰减
3. 未按要求进行细胞特性定期检测
4. 解冻后未及时接种导致贴壁失败
本产品符合国际干细胞研究学会标准,每批次提供STR鉴定报告及支原体检测证明。