一、细胞基本属性
细胞名称
人软骨细胞（Human Chondrocytes）
细胞别称
软骨细胞；关节软骨细胞；透明软骨细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无关节疾病史）
组织来源
关节软骨组织（膝关节或髋关节）
生长特性
贴壁生长（需胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
细胞形态
多角形或梭形，胞质内可见脂滴及糖胺聚糖颗粒
细胞代数
P3 - P8（维持软骨特异性表型及功能）
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
Chondrocyte Growth Medium（含5% FBS + 转化生长因子β1）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及糖胺聚糖保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时（与细胞分化状态及培养体系相关）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管，800rpm离心3分钟
培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱4小时，待细胞贴壁后更换新鲜培养基
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（需避免过度融合导致去分化）
传代比例
1:2至1:3（建议使用Ⅱ型胶原酶消化替代胰酶）
消化方法
采用0.25%胶原酶Ⅱ型消化液，37℃振荡消化20 - 30分钟
镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化，离心收集细胞悬液
注意事项
维持低氧环境（5% O₂）可增强软骨表型稳定性
传代后48小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 1%海藻糖）
细胞密度
冻存浓度：2×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
消化离心后缓慢滴加冻存液混匀，分装至冻存管
程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证
复苏后48小时阿尔新蓝染色检测蛋白多糖合成能力
qPCR验证Col2A1基因表达量（P5代细胞应高于阈值）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
2. 到货7天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞增殖能力低于标准（传代3次后仍无法达到80%融合）
4. 特定标志物染色结果与质控数据偏差超过20%
不予重发情形
1. 未使用指定胶原包被培养器皿导致细胞去分化
2. 自行修改培养基配方引发细胞表型改变
3. 超低温保存设备故障导致反复冻融
4. 未按规范进行软骨特异性功能验证即开展后续实验
