一、细胞基本属性
- 细胞名称:人表皮干细胞(Human Epidermal Stem Cells)
- 细胞别称:表皮祖细胞;皮肤干细胞;角质形成前体细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体无皮肤病史或遗传性疾病)
- 组织来源:皮肤表皮基底层或毛囊隆突区
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被的基质)
- 细胞形态:克隆样集落生长,单层形成时呈多角形或圆形,核质比高
- 细胞代数:P3 - P8(维持干性标志物表达及增殖潜能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用表皮干细胞培养基(含5% FBS、表皮生长因子及钙离子调节剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(受培养密度及生长因子调控)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗、药物生产或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经酒精擦拭后静置于培养箱内平衡2小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代,避免过度分化)。
- 传代比例:1:3至1:4(推荐初始接种密度为2×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.05% Trypsin - EDTA溶液(含钙离子螯合剂),37℃消化1 - 2分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止反应。
- 注意事项:避免消化时间过长导致分化标记物表达;传代后12小时内更换新鲜培养基以去除死细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、20%血清替代物及抗氧化剂)。
- 细胞密度:建议冻存浓度为1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:细胞离心后重悬于冻存液,分装至冻存管,按梯度降温程序保存:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后24小时内检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%),并通过克隆形成实验或β1 - integrin免疫荧光验证干性特征。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中温度记录异常或干冰耗尽导致细胞死亡(需提供物流温度记录及包装照片);
2. 收到细胞3日内经PCR检测证实支原体污染;
3. 复苏后细胞活性低于90%(需提供台盼蓝染色结果及显微镜图像);
4. STR分型结果与备案信息不符。
- 不予重发情形:
1. 细胞解冻后未在48小时内接种或更换培养基;
2. 使用非指定培养基(如高钙环境诱导分化)导致功能异常;
3. 未按规范进行冻存或反复冻融;
4. 实验前未进行支原体检测导致污染扩散。