一、细胞基本属性
细胞名称:人硬脑膜成纤维细胞(Human Dura Mater Fibroblasts)
细胞别称:HDF;硬脑膜成纤维细胞;脑膜间质细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体无中枢神经系统疾病史)
组织来源:硬脑膜组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被)
细胞形态:典型长梭形或纺锤状,平行排列生长
细胞代数:P3 - P8(功能活性稳定,遗传背景明确)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 生长因子复合物)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(与传代密度及培养条件相关)
供应限制:仅供科学研究,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精表面消毒后立即移入培养箱静置
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔拍打促进脱落
注意事项:
- 终止消化时需添加含血清培养基中和
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 营养保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应保持分泌活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供检测证据)
3. 复苏存活率低于承诺值(需提供染色结果)
4. 细胞STR谱系与申报不符
不予重发情形:
1. 超时复苏(收货后超过48小时未处理)
2. 自行修改培养基配方导致功能异常
3. 未按规范进行细胞传代或冻存
4. 实验操作污染未及时反馈
注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因个体差异存在轻微波动