一、细胞基本属性
细胞名称
人毛囊干细胞(Human Hair Follicle Stem Cells)
细胞别称
HFSC;毛囊干细胞;毛囊源性干细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无皮肤疾病史)
组织来源
毛囊隆突区或毛囊外根鞘
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白基质涂层)
细胞形态
集落状生长,呈小圆形或多角形,核质比高
细胞代数
P3 - P8(维持干细胞特性及分化潜能)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
干细胞专用培养基(含5% FBS + 表皮生长因子 + 胰岛素样生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(受基质条件及生长因子浓度影响)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(建议初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.02% EDTA或低浓度胰酶(0.05% Trypsin - EDTA)
37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
避免机械刮取(保护细胞表面标记物完整性)
传代后48小时内避免频繁观察以减少外界干扰
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心后弃上清,轻柔重悬细胞于冻存液
梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:克隆形成实验(P5代细胞应保持≥70%集落形成率)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 收货后72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(按规范操作验证)
4. 干细胞标志物(如CD200、CD34)表达不达标
不予重发情形
1. 解冻后未及时接种(超过24小时)
2. 自行更换培养基导致细胞分化或死亡
3. 未按规范进行干细胞特性鉴定(如流式检测缺失)
4. 实验操作不当导致遗传特性改变