一、细胞基本属性
- 细胞名称:人外周血巨噬细胞(Human Peripheral Blood Macrophages)
- 细胞别称:PBMC来源巨噬细胞;外周血单核细胞衍生巨噬细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体经传染病及免疫疾病筛查)
- 组织来源:外周血单核细胞经体外分化诱导
- 生长特性:贴壁生长(需特定细胞因子支持)
- 细胞形态:不规则多形性,活化后呈伸展状或梭形
- 细胞代数:原代培养,建议使用前3代(P0 - P3)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640基础培养基(含10% FBS + 20ng/mL M - CSF)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及糖原保护剂), - 150℃以下长期保存
- 增殖特性:终末分化细胞,体外无持续增殖能力
- 供应限制:仅供基础研究,不可用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒外包装,直接置于CO₂培养箱静置4小时。
- 分化诱导:单核细胞需经7天M - CSF诱导培养形成成熟巨噬细胞。
- 传代标准:贴壁细胞密度达80%以上(通常无需传代)。
- 消化方法:
- 使用细胞刮轻柔机械剥离。
- 或0.25% Trypsin - EDTA室温消化5分钟(可能影响表面标志物)。
- 注意事项:
- 避免频繁换液导致细胞活化。
- 活化实验需添加LPS或IFN - γ等刺激因子。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO + 10%葡萄糖)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液。
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:吞噬荧光微球实验(P1代细胞吞噬效率应>70%)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)。
2. 72小时内经流式检测证实CD14/CD68表达缺失。
3. 内毒素检测水平>0.1EU/mL(需第三方检测报告)。
4. 细胞数量误差超过标称值20%。
- 不予重发情形:
1. 未按规范进行M - CSF诱导直接使用单核细胞。
2. 使用胎牛血清替代指定培养基成分。
3. 超过建议代数(P3)导致功能退化。
4. 未执行无菌操作引发污染。
注:本产品需配合专用细胞因子套装使用,实验前需完成供体HLA分型备案。