一、细胞基本属性
- 细胞名称:人脾脏微血管内皮细胞(Human Splenic Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:HSMEC;脾微血管内皮细胞;脾窦内皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无脾脏疾病史)
- 组织来源:脾脏组织微血管段(经胶原酶灌注消化法分离)
- 生长特性:贴壁生长(需预包被纤维连接蛋白或明胶基质)
- 细胞形态:典型铺路石样单层,接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数:P3 - P8(经STR鉴定,确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS、VEGF及bFGF生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞冻存保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受细胞密度及生长因子浓度影响)
- 供应限制:仅限于科学研究,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管,离心后重悬接种。
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置于37℃培养箱平衡2小时后观察贴壁情况。
- 传代标准:融合度达80% - 90%时传代(建议每3天观察一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.05%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 2分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:避免消化时间过长导致细胞膜损伤;传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:细胞悬液与冻存液按1:1混合,分装至冻存管后采用程序降温盒梯度冷冻(4℃→ - 20℃→ - 80℃→液氮)
- 复苏验证:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法);P5代细胞需通过CD31免疫荧光验证内皮特性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 收货7日内检测出支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞STR分型与标准品不一致
4. 复苏后存活率低于85%(需提供染色检测视频)
- 免责条款:
1. 客户未按操作规范进行培养导致污染
2. 使用非配套培养基或未添加必需生长因子
3. 冻存细胞反复融解超过2次
4. 收货超过72小时未进行复苏操作
注:本产品经ISO9001质量体系认证,提供完整COA报告及细胞STR鉴定数据。