一、细胞基本属性
细胞名称
人牙周膜干细胞（Human Periodontal Ligament Stem Cells）
细胞别称
PDLSCs；牙周膜间充质干细胞；牙周膜祖细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体口腔无炎症及牙周病史）
组织来源
拔除的健康第三磨牙牙周膜组织
生长特性
贴壁生长（依赖胶原酶消化分离）
细胞形态
长梭形成纤维样，融合后呈漩涡状排列
细胞代数
P3 - P10（维持干细胞表面标志物表达及分化潜能）
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.5mL冻存管（含专用冻存液）
培养基
α - MEM基础培养基（含10% FBS + 成纤维细胞生长因子 + 抗坏血酸）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清程序冻存液（含DMSO及胎牛血清替代物），液氮气相长期保存
倍增时间
约36 - 48小时（与细胞密度及传代方法相关）
供应限制
研究级产品，禁止用于人体移植或商业化生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬接种
培养瓶：酒精擦拭表面后静置平衡，6小时内首次换液
传代标准
融合度达70% - 80%（避免过度融合导致自发分化）
传代比例
1:3至1:4（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶Ⅰ型）
37℃消化3 - 5分钟，离心后完全去除酶液
注意事项
维持低氧环境（3% O₂）可增强干细胞特性
传代后48小时内避免诱导分化操作
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
血清型冻存液（含90% FBS + 10% DMSO）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
梯度降温：室温→4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证
存活率≥85%（AO/PI双染色法）
分化潜能检测：成骨/成脂诱导21天后染色验证
四、售后服务承诺
重发标准
1. 干冰运输链断裂导致细胞失活（需物流温度记录证明）
2. 到货72小时内经STR鉴定显示交叉污染
3. 流式检测CD73/CD90/CD105阳性率＜90%
4. 成骨诱导后碱性磷酸酶活性缺失
不予重发情形
1. 未使用配套消化酶导致细胞膜损伤
2. 自行更改基础培养基成分影响细胞特性
3. 未按时传代导致细胞衰老（SA - β - gal阳性率＞30%）
4. 诱导分化后未及时固定导致检测失效
