一、细胞基本属性
细胞名称:人牙髓干细胞(Human Dental Pulp Stem Cells)
细胞别称:HDPSCs;牙髓间充质干细胞;牙髓源干细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源:第三磨牙(智齿)或其他正畸拔除牙齿的牙髓组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或成纤维样,单层融合后呈漩涡状排列
细胞代数:P3 - P8(确保干细胞多向分化潜能及基因组稳定性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:专用间充质干细胞培养基(含10% FBS + 成纤维生长因子组合)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含10% DMSO及血清替代物),液氮气相长期保存
增殖能力:群体倍增时间约24 - 48小时(与供体年龄及培养条件相关)
应用限制:仅限于科学研究,禁止临床治疗或基因编辑实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
①冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基
②培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐传代周期5 - 7天)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
①使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
②37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
①避免消化超时(影响细胞膜表面标志物表达)
②传代后48小时内完成首次半量换液
三、细胞冻存操作规范
冻存液组成:无动物源冻存液(含10% DMSO + 海藻糖保护剂)
细胞密度:推荐冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存流程:
①梯度降温程序:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
②全程使用程序冷冻盒控制降温速率( - 1℃/min)
质检标准:
①复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
②分化能力验证:成骨/成脂诱导14天后特异性染色阳性
四、售后服务承诺
质保范围:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7日内经检测存在支原体污染(需提供第三方报告)
3. 细胞STR分型与备案数据不符
4. 未诱导状态下自发分化率>5%
免责条款:
1. 客户未按规范进行细胞复苏及传代操作
2. 使用非指定培养基或添加未经验证生长因子
3. 实验过程中接触辐射源或化学诱变剂
4. 未执行定期支原体检测导致污染扩散
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室标准,细胞特性可能因个体差异存在批次间波动)