一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人角膜上皮细胞（Human Corneal Epithelial Cells）
2. 细胞别称：HCEpiC；角膜上皮细胞；角膜表层细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
5. 组织来源：角膜组织上皮层
6. 生长特性：贴壁生长（依赖基底膜基质成分）
7. 细胞形态：典型多角形或铺路石样单层，接触抑制后形成紧密连接结构
8. 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与遗传一致性）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：角膜上皮细胞专用培养基（含1% FBS + 表皮生长因子添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后，静置培养箱2小时平衡
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化30 - 60秒，镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
5. 注意事项
- 严格控制消化时间（避免细胞间紧密连接破坏）
- 传代后12小时更换培养基以去除残留酶及碎片
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转入液氮
4. 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：荧光标记ZO - 1蛋白检测紧密连接完整性（P5代细胞应维持屏障特性）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供干冰包装状态证明）
- 3天内确认微生物污染（需提供PCR或培养检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（台盼蓝染色法）
- STR鉴定与产品描述不符
2. 不予重发情形
- 客户未按规范在72小时内复苏细胞
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常
- 因反复冻融导致的细胞损伤
- 未进行污染检测直接用于实验
注：本产品严格遵循伦理规范，所有组织来源均通过合规途径获取。
