一、细胞基本属性
- 细胞名称:人牙龈上皮细胞(Human Gingival Epithelial Cells)
- 细胞别称:HGEC;牙龈上皮细胞;口腔上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体无口腔疾病史)
- 组织来源:牙龈组织上皮层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数:P2 - P6(确保角质蛋白表达稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25胶原包被培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:上皮细胞专用培养基(含1.2mM钙离子 + 表皮生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无动物源冻存液(含植物源保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约60 - 72小时(依赖钙离子浓度及细胞密度)
- 供应限制:仅限体外研究使用,禁止体内移植或药物筛选
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后,离心去除冻存液,使用胶原包被培养瓶接种
- 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准:融合度达70% - 80%时传代(高密度易诱导终末分化)
- 传代比例:1:2至1:3(建议预铺纤维连接蛋白增强贴壁)
- 消化方法:使用0.02% EDTA溶液预处理10分钟,配合低浓度胰酶(37℃消化3 - 5分钟)
- 注意事项:终止消化时需添加含血清培养基,首次换液需保留部分条件培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无动物源冻存液(含海藻糖替代DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:梯度降温程序:4℃平衡30分钟, - 80℃专用冻存盒过夜,液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时角蛋白19免疫荧光检测,存活率≥85%视为合格
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞团块化(需提供温度记录曲线)
2. 收到后72小时内证实黑胶虫污染(需提供相差显微镜影像)
3. 细胞角蛋白免疫鉴定结果不符
4. 原代标志物CK13/CK14表达缺失
- 免责条款:
1. 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 自行添加高浓度维生素A诱导异常分化
3. 消化过程中机械吹打造成膜损伤
4. 未按标准进行气液界面培养操作