一、细胞基本属性
- 细胞名称：人颊黏膜成纤维细胞（Human Buccal Mucosa Fibroblasts）
- 细胞别称：HBMF；口腔黏膜成纤维细胞；颊部成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无口腔疾病史）
- 组织来源：颊黏膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白及胶原基质）
- 细胞形态：长梭形或星形，平行排列呈束状或网状
- 细胞代数：P3 - P8（维持增殖活性与分泌功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Fibroblast Growth Medium（含5% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（受细胞密度与生长因子浓度影响）
- 供应限制：仅供科学研究，禁止用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项
- 避免消化时间过长（防止细胞外基质蛋白降解）
- 首次换液需在传代后12小时内完成，及时清除悬浮细胞
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及血清替代保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心后轻柔重悬细胞于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P5代细胞应保持基础分泌功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 5日内确认微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞贴壁率低于80%（经形态学评估）
4. 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
1. 未按规范进行细胞复苏（如解冻后静置超过24小时）
2. 自行更改培养基配方导致功能异常
3. 未使用指定基质包被培养器皿
4. 未执行定期支原体检测造成交叉污染
注：本简介内容均基于标准操作流程制定，实际应用需结合实验室具体条件优化。
