一、细胞基本属性
细胞名称:人根尖牙乳头干细胞(Human Apical Papilla Dental Pulp Stem Cells)
细胞别称:SCAP;根尖乳头间充质干细胞;牙源性干细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康青少年(恒牙萌出期供体,性别不限,无口腔疾病史)
组织来源:未成熟恒牙根尖乳头组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养表面)
细胞形态:长梭形或纺锤状,单层贴壁后呈漩涡状排列
细胞代数:P3 - P10(维持干细胞多向分化潜能)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1.2mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:专用间充质干细胞培养基(含5%血小板裂解液+基础生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清细胞冻存液(含5% DMSO及海藻糖保护剂),液氮气相长期保存
增殖能力:群体倍增时间约30 - 40小时(低密度培养条件下)
应用范围:仅限基础研究,禁止用于临床治疗或基因编辑实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴振荡解冻≤1分钟,预冷培养基梯度稀释
- 贴壁培养瓶:移除运输液后补充2mL新鲜培养基静置培养
传代标准:融合度达70% - 80%时传代(避免接触抑制影响干细胞特性)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,离心后重悬于含血清终止液
关键事项:
- 维持低氧环境(3% O₂)可增强干细胞增殖活性
- 传代后48小时内避免更换培养基以保留自分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液组成:无动物源成分冻存液(7% DMSO + 10%右旋糖酐)
细胞浓度:最佳冻存密度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
程序步骤:
- 4℃预冷冻存管,分装细胞悬液后密封标记
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
质量验证:
- 复苏存活率≥90%(AO/PI双染法检测)
- 干细胞特性验证:流式检测CD73/CD90/CD105阳性率>95%
四、售后服务承诺
质保条款:
1. 干冰运输链断裂导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7日内经PCR证实微生物污染
3. 细胞表面标志物表达不符合技术参数
4. 成骨/成脂分化能力未达标准
免责声明:
1. 客户自行修改培养体系导致的性状改变
2. 未使用配套分化培养基进行诱导实验
3. 液氮存储设备故障造成的细胞损失
4. 超过推荐代数(P10)继续扩增引发的遗传变异
注:所有操作需符合《人间充质干细胞研究伦理指导原则》,本产品不涉及人类遗传资源跨境转移。