一、细胞基本属性
细胞名称
人胎盘绒毛膜滋养层细胞(Human Placental Chorionic Trophoblast Cells)
细胞别称
胎盘滋养层细胞;绒毛膜滋养层细胞;CTB细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康足月产妇胎盘(供体筛选无妊娠并发症及感染史)
组织来源
胎盘绒毛膜组织
生长特性
贴壁生长(依赖细胞外基质涂层)
细胞形态
典型多角形或铺路石样单层排列,接触抑制后形成紧密连接
细胞代数
P3 - P8(维持滋养层特异性标志物表达及功能活性)
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
专用滋养层细胞培养基(含2% FBS+生长因子及激素添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(依赖培养密度及基质条件)
供应限制
仅限科学研究使用,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀;培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡2小时。
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)。
传代比例
1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)。
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含钙镁离子缓冲液),37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
注意事项
避免剧烈吹打损伤细胞表面黏附蛋白;传代后12小时更换培养基以去除残留消化液。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
细胞密度
推荐冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
离心收集细胞后重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
复苏验证
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%);功能验证:β - hCG分泌检测(P5代细胞应维持激素分泌功能)。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明);
2. 收货3日内经PCR证实支原体或细菌污染;
3. 复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色结果);
4. 细胞STR谱系与数据库记录不符。
不予重发情形
1. 未按规范在72小时内复苏细胞;
2. 使用非推荐培养基或添加剂导致功能异常;
3. 自行反复冻融造成细胞损伤;
4. 未执行无菌操作引发污染。