一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells）
2. 细胞别称：HUVEC；脐静脉内皮细胞；血管内皮细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康新生儿（性别不限，供体筛选无遗传性疾病史）
5. 组织来源：脐带静脉血管段
6. 生长特性：贴壁生长（依赖明胶或纤维连接蛋白包被）
7. 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈扁平多角形
8. 细胞代数：P3 - P8（确保内皮标志物表达及屏障功能稳定性）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：Endothelial Cell Growth Medium（含5% FBS + 肝素 + 内皮生长因子）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~48 - 72小时（依赖包被基质与细胞密度）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时适应环境
2. 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（通常每2 - 3天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.1%胶原酶II或0.05% Trypsin - EDTA（37℃消化2 - 3分钟）
- 镜下观察细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止
5. 注意事项
- 避免频繁传代（防止VEGF受体表达下调）
- 换液时保留部分条件培养基以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 胰酶消化后离心收集，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率（应≥90%）
- 功能验证：CD31免疫荧光染色及血管形成实验（P5代细胞需保持成管能力）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法复检）
- 细胞STR谱系与数据库不符
2. 不予重发情形
- 解冻后超48小时未进行贴壁培养
- 使用非指定包被基质导致细胞脱落
- 未按时换液引发的细胞状态异常
- 未按要求进行血管生成实验前预处理
