一、细胞基本属性
细胞名称:人脐动脉内皮细胞(Human Umbilical Artery Endothelial Cells)
细胞别称:HUAEC;脐动脉内皮细胞;血管内皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康新生儿(性别不限,供体筛选无先天性疾病史)
组织来源:脐带动脉段
生长特性:贴壁生长(需明胶包被培养器皿)
细胞形态:典型单层铺路石状排列,接触抑制后呈梭形
细胞代数:P3 - P8(维持内皮标志物高表达)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:EGM - 2 BulletKit培养基(含2% FBS及血管生成因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无动物源冻存液(含植物源保护剂),液氮气相长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与细胞密度正相关)
应用限制:仅用于体外研究,禁止临床移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴快速解冻后,转移至含5mL预温培养基的离心管
- 培养瓶处理:表面消毒后静置4小时再换液
传代标准:80% - 90%融合度(建议每周传代2次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方案:
- 0.25%胰酶 - EDTA室温消化2 - 3分钟
- 显微镜下观察细胞边缘卷曲即终止
关键要点:
- 传代后6小时需补充VEGF因子(5ng/mL)
- 禁止使用钙离子螯合剂
三、细胞冻存操作规范
冻存液组成:无血清冻存液(含7.5% DMSO + 海藻糖)
冻存密度:1.5×10⁶ cells/mL(每支冻存管1mL)
冻存程序:
- 程序降温仪分步冻存: - 1℃/min至 - 80℃
- 液氮储存前需密封防爆管
质检标准:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- CD31免疫荧光染色阳性率>98%
四、售后服务承诺
质量保障:
1. 液氮运输中温度异常导致失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经流式检测证实内皮标志物缺失
3. 细胞污染经第三方检测确认(需提交原始数据)
免责条款:
1. 客户自行修改培养基配方导致功能异常
2. 未使用推荐包被材料引起贴壁失败
3. 超代次使用(P8代以上)引发的特性改变
4. 未执行标准复苏程序造成的细胞损伤
(注:实际参数需根据具体产品批次调整,本说明为通用技术文档模板)