一、细胞基本属性
- 细胞名称：人羊膜间充质干细胞（Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells）
- 细胞别称：hAMSC；羊膜间充质干细胞；羊膜源性干细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 供体信息：健康产妇剖宫产术后羊膜组织（经伦理审查及传染病筛查）
- 组织来源：羊膜组织（胎盘绒毛膜外层无血管区）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤连蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤形，单层贴壁后呈漩涡状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保持干细胞多向分化潜能及基因组稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管（无血清冻存体系）
- 培养基：Mesenchymal Stem Cell Medium（含10% FBS + 成纤维生长因子补充剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含5% DMSO及海藻糖保护剂），液氮长期保存
- 增殖能力：群体倍增时间约36 - 48小时（密度依赖性显著）
- 应用限制：仅供科学研究，禁止临床治疗或基因编辑实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管复苏：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基离心洗涤
- 培养瓶运输：75%酒精表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，离心后重悬于新鲜培养基
- 注意事项
- 严格控制消化时间（避免细胞膜完整性损伤）
- 首次换液需在接种后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清程序冻存液（含8% DMSO及胎牛血清替代物）
- 冻存密度：推荐浓度：2×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存程序：梯度降温：4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮气相长期储存
- 质量验证
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 干细胞特性检测：流式检测CD73/CD90/CD105阳性率＞95%
- 多向分化验证：成骨/成脂诱导分化能力检测（提供标准方案）
四、售后服务承诺
- 重发条款
1. 干冰运输过程中温度记录异常（需提供物流温度监控报告）
2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染
3. 复苏后活率低于承诺值（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. STR分型与数据库信息不匹配
- 免责声明
1. 客户自行修改培养条件导致的细胞功能异常
2. 未按规范进行传代引发的基因组不稳定性
3. 细胞冻存后未及时转移至液氮导致的活性丧失
4. 超出规定代数（P8）后继续使用引发的实验偏差
