一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肺动脉平滑肌细胞(Mouse Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:mPASMC;肺动脉平滑肌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经筛选无心血管疾病史)
- 组织来源:肺动脉中膜层
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形,平行排列生长,高密度时呈“峰谷”状结构
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS+生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-150℃以下)
- 倍增时间:约36 - 48小时(受血清浓度及细胞密度影响)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床、药物开发或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱2小时恢复贴壁
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免频繁观察扰动细胞(平滑肌细胞对机械应力敏感)
- 传代后48小时内避免换液,以维持细胞分泌的自分泌因子
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代保护剂)
- 细胞密度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL(离心后重悬体积≤1mL)
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证
- 存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P4代细胞阳性率>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 到货3日内经检测确认污染(需提供污染源PCR/培养证据)
- 复苏后细胞贴壁率<80%(需提供接种后24小时显微照片)
- 物种鉴定结果与描述不符(STR检测报告为证)
- 不予重发情形
- 未按说明书要求进行胶原包被导致贴壁失败
- 使用非推荐培养基(如内皮细胞培养基)
- 自行修改冻存液配方或冻存程序
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染