一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脐带间充质干细胞(Mouse Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells)
- 细胞别称:MUC - MSC;脐带间充质干细胞;脐带干细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康新生小鼠(性别不限,供体筛选无遗传缺陷)
- 组织来源:脐带华通氏胶(Wharton’s jelly)
- 生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,单层贴壁后呈漩涡状排列
- 细胞代数:P3 - P10(确保多向分化潜能及增殖活性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Mesenchymal Stem Cell Medium(含10% FBS+特定生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依培养条件及传代密度而异)
- 供应限制:仅供科学研究,不可用于临床治疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时适应环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)。
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔吹打至细胞脱落。
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性)。
- 首次换液需在贴壁后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀。
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)。
- 功能验证:成骨/成脂分化能力检测(P5代细胞应保持多向分化潜能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 5日内确认微生物污染(需提供污染检测报告)。
- 细胞复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色证据)。
- 流式检测表面标志物(CD90+/CD45 - )不符合标准。
- 不予重发情形:
- 收货后未及时处理(超过48小时未复苏)。
- 使用非推荐培养基导致分化异常。
- 未按规范进行无菌操作引发污染。
- 未进行细胞鉴定直接用于实验。