一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脐静脉内皮细胞(Mouse Umbilical Vein Endothelial Cells)
- 细胞别称:MUVEC;脐静脉内皮细胞;血管内皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康新生鼠(周龄:出生后6 - 8周,性别可指定)
- 组织来源:脐静脉血管段(无菌分离提取)
- 生长特性:贴壁生长(需预包被明胶或纤维连接蛋白基质)
- 细胞形态:单层铺展呈扁平多角形,融合后呈现典型“铺路石”样排列
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS、肝素、内皮细胞生长因子及抗生素)
- 培养条件:气相:5% CO₂,温度:37℃,湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与培养密度及基质条件相关)
- 供应限制:仅用于科学研究,不可用于临床、药物开发或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后离心,重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代,避免过度生长)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 消化后轻柔吹打避免机械损伤
- 首次换液需在贴壁后6 - 8小时进行
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(离心后重悬体积精准控制)
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能检测:CD31免疫荧光染色验证内皮特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货3日内检测出微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供染色结果及显微图像)
- 种属鉴定结果与描述不符(STR或PCR检测为小鼠来源)
- 不予重发情形:
- 未按说明书要求进行细胞复苏或传代操作
- 使用非配套培养基或添加未经验证的生长因子
- 因反复冻融或不当保存导致细胞损伤
- 未在收到细胞后72小时内启动标准培养流程