一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠视网膜前体细胞（Mouse Retinal Progenitor Cells）
- 细胞别称：视网膜祖细胞；视网膜干细胞；RPCs
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 发育阶段：胚胎期或新生小鼠（视实验需求定制）
- 组织来源：视网膜组织（神经上皮层）
- 生长特性：贴壁生长（依赖特定基质涂层）
- 细胞形态：圆形或梭形，集落样增殖
- 细胞代数：P3 - P8（确保干性维持及分化潜能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：神经基础培养基（含2% B27添加剂、20 ng/mL EGF及bFGF）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 增殖能力：传代周期约48 - 72小时（受生长因子浓度影响）
- 应用限制：仅限体外研究，不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预温培养基轻柔混匀离心，重悬接种。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时，待温度稳定后更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞集落融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA或Accutase溶液，37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度（防止干性标记物丢失）；
- 传代后48小时内避免换液，以保留自分泌生长因子；
- 建议使用基质胶（Matrigel）包被培养器皿，提升贴附效率。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO、40%基础培养基及50%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化收集细胞，离心后重悬于冻存液；
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥85%）；
- 干性验证：Nestin及Pax6免疫荧光染色阳性率需＞90%；
- 分化潜能检测：撤除生长因子后可分化为视网膜神经元或胶质细胞。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中液氮罐泄漏或温度异常（需提供物流温度记录）；
- 到货72小时内证实支原体/真菌污染（需提供第三方检测报告）；
- 细胞复苏存活率低于85%（经双方共同检测确认）；
- 基因型鉴定（如特定转基因品系）与订单不符。
- 不予重发情形：
- 未按推荐条件保存（如冻存管未及时转移至液氮）；
- 自行更改培养基配方导致细胞分化或死亡；
- 传代超过P10代次后功能异常；
- 实验操作污染未及时反馈（超过7天）。
