一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠气管平滑肌细胞(Mouse Tracheal Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:TSMC;气管平滑肌细胞;气道平滑肌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无呼吸道疾病史)
- 组织来源:气管组织中分离的平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形或纺锤状,融合后呈束状平行排列
- 细胞代数:P3 - P6(确保收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS + 胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养基成分及细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精表面消毒后静置于培养箱2小时,待温度平衡后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项:
- 消化后需加入含血清培养基充分中和
- 首次传代建议保留原代培养液成分以维持收缩特性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩响应(P4代细胞需维持药理性收缩能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 收到后48小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
- 标志物检测与描述不符(α - SMA阳性率≥95%)
- 不予重发情形:
- 未按推荐培养基进行培养导致功能丧失
- 解冻后存放超过48小时未接种
- 自行修改冻存程序造成细胞损伤
- 未进行功能验证即开展后续实验
(注:本产品需配合专用培养基及包被试剂使用,实验前请详阅操作手册。)